Colonne de chromatographie

La colonne de chromatographie se compose d’un long tube en verre qui possède un robinet à sa base. Le haut de la colonne peut être rodée, si c’est le cas, il est possible d’effectuer des connexions étanches entre la colonne de chromatographie et le reste d’un dispositif chimique.

Le principe de la chromatographie sur colonne est similaire à celui sur couche mince, la silice se trouve alors dans la colonne et non sur la plaque.
Les composés possèdent des affinités variables avec la silice, ainsi ils sont naturellement entrainés par l’éluant le long de la colonne à des vitesses différentes.

Préparation de la colonne

• Déposer du sable fin sur une hauteur de $1\ \text{cm}$ environ.
• Verser du gel de silice au $\frac 23$ de la hauteur de la colonne.
• Humidifier le gel à l’aide d’une pipette remplie d’eau distillée (le premier éluant), jusqu’à ce que le gel soit entièrement humide. Lorsqu’une fine couche d’eau stagnera sur le gel, cela signifiera que celui-ci est assez humidifié.
• Finir avec du sable fin sur une hauteur de $1\ \text{cm}$.

Dépôt de l’échantillon

• Déposer quelques gouttes de la solution à analyser en haut de la colonne à l’aide de la pipette pasteur. Le produit ne doit pas toucher les parois du tube.
• Pousser délicatement avec le pipeteur afin d’imprégner le gel de silice.

Élution

• Ajouter l’éluant jusqu’à récupérer le premier composé dans un becher ou dans un tube à essai.
• Lorsque le produit est entièrement recueilli, changer de récipient.
• Utiliser le second éluant afin de prélever le second composé.